低温诱导下山葡萄VaCBF4基因启动子功能分析

    成果编号：9642023J1096
    第一完成单位名称：宁夏大学
    联系人：宁夏回族自治区教育厅 联系人电话：18809578928
    成果简介：
    项目以抗寒山葡萄左山-1（V. amuerensis cv. Zuoshan-1）扦插盆栽苗为材料，提取4℃低温处理0、2、4、8、12、24 h后叶片总RNA，采用SMART技术反转录为cDNA，经过纯化后获得初级cDNA文库，对初级文库进行扩增、提取文库质粒后转入酵母Y187菌株中，制作扩增的酵母文库，最终构建了低温胁迫下山葡萄叶片酵母cDNA文库，为筛选山葡萄低温胁迫下的互作蛋白提供了材料基础。通过同源克隆获得VvCBF4和VaCBF4基因启动子，分析二者序列的异同，利用构建好的酵母文库，通过酵母单杂交实验筛选出了VaCBF4互作的转录因子，VaMYB24。通过“一对一”酵母单杂交试验，最终确定VaMYB24可以与VaCBF4启动子互作。推测VaMYB24、转录因子在VaCBF基因自身调控中发挥一定作用。项目发表论文2篇，授权实用新型专利1项。