黑果枸杞无选择标记遗传转化体系的建立

    成果编号：9642023J1042
    第一完成单位名称：宁夏大学
    联系人：谢铁娜 联系人电话：13469690504
    成果简介：
    本项目建立的黑果枸杞高效植株再生与遗传转化体系，以黑果枸杞叶片为外植体，农杆菌侵染液OD600为0.25，共培养3天，卡那霉素（kanamycin）和羧苄西林（carbenicillin）浓度分别为25 mg/L-1和250 mg/L-1时，愈伤组织阳性诱导率为85.47%，出芽生根后经PCR鉴定，阳性转化率为29%；且导入的外源sGFP基因均有较高的表达水平。在此基础上，本项目建立了基于Cre/Lox系统的无选择标记遗传转化系统，在诱导剂浓度为0.2g/L时，可有效删除阳性转基因植株的筛选标记基因GFP及NPT基因。
  本项目的实施为利用安全转基因新技术进行黑果枸杞功能基因表达调控、性状改良，提供新的技术途径。项目发表论文2篇。